Z6尊龙凯时

无需厌氧造就前提即可检测环境中艰巨梭菌分离株的选择性造就基

受传染的环境表表是艰巨梭菌传布的一个沉要起源
。很多钻研批注，医疗机构的环境消毒成效往往不尽如人意
。对检测孢子传染有效且单一易操作的步骤，将有助于通过鉴别环境传染，并提供一种监测消毒成效的伎俩，从而为改善环境消毒做出相应过问措施
。商用 PCR 检测步骤易于使用且宽泛可用，但其活络度可能不及以检测低水平的环境传染
。传统造就基的检测步骤对检测艰巨梭菌很敏感，但由于对厌氧造就前提和微生物学专业知识的要求较高，其实用性大打折扣
。选择性厌氧肉汤造就预扩增毒素基因实时PCR检测为检测无症状艰巨梭菌传染物提供了一种敏感的步骤，这种步骤可用于环境传染的检测，但其局限性蕴含必要厌氧造就前提和PCR检测的用度
。

本钻研的指标是开发一种廉价且易于使用的有效的检测步骤
。因而推荐这篇文章给各人，但愿能对各人有所援手
。

Sensitive and Selective Culture Medium for Detection of Environmental Clostridium difficile Isolates without Requirement for Anaerobic Culture Conditions

内容

提要：有效且易于使用的检测艰巨梭菌孢子传染的步骤将有助于确定环境蓄水池和监测室内消毒的成效

；谠炀突募觳獠街瓒约觳饧杈匏缶苊舾，但由于必要厌氧造就前提和微生物检验，其实用性受到限度
。作者改进了一种含有硫代乙醇酸和L-胱氨酸的低成本选择性肉汤造就基，称为含硫代乙醇酸和L-胱氨酸的艰巨梭菌布鲁氏菌肉汤（CDBB-TC），用于检测需氧造就前提下环境标本中的艰巨梭菌
。比力了 CDBB-TC（需氧造就前提下）和 CDBB（厌氧造就前提下）从病房表表采集的拭子中回收艰巨梭菌的活络度和特异性
。CDBB-TC 在回收环境艰巨梭菌方面的活络度显著高于 CDBB（别离为 36/41 [88%] vs 21/41 [51%]
；P = 0.006）
。艰巨梭菌乳胶凝聚试验、毒素A和毒素B或谷氨酸脱氢酶酶联免疫测定以及毒素B基因PCR检测都是有效简直证试验
。在总共 477 份环境造就物中，凭据造就基呈黄色（阳性反映），但现实未发现艰巨梭菌，CDBB-TC与CDBB的特异性别离为 100%（0个假阳性了局）和 96%（18个假阳性了局）
。CDBB的假阳性造就是由于在CDBB-TC 中不成长的厌氧非艰巨梭菌的成长造成的
。Z6尊龙凯时了局批注，CDBB-TC 为从环境样本中回收艰巨梭菌提供了一种活络且拥有选择性的造就基，且无需厌氧造就前提
。

了局与会商

艰巨梭菌在CDBB与CDBB-TC中的萌发和成长的区别：

    如图1所示，CDBB-TC和CDBB的艰巨梭菌孢子萌发和成长的快率和水平类似（图1）
。凭据对酒精的敏感性，约莫90%的孢子（1 log）在30 min内萌发
。

CDBB-TC和CDBB在尝试室的活络度和选择性：

    从接种拭子中回收艰巨梭菌孢CDBB-TC与CDBB相当（图2）
。CDBB-TC和CDBB在接种2 log10 CFU孢子的拭子中一致获得阳性了局
。从接种1 log₁₀ CFU孢子的拭子中获得阳性了局
；9次试验中有3次（33%）CDBB阳性，9次试验中有7次（78%）CDBB-TC阳性
。CDBB阳性造就在整个造就基管中呈黄色，而CDBB-TC阳性造就在造就管底部呈

CDBB-TC与CDBB对从病房表表网络的拭子中回收艰巨梭菌的敏感性和特异性：

总共从477个表表网络了环境拭子（345个来自CDI病房的表表，132个来自便携式设备）
。如图3所示，41份样品（9%）的CDBB-TC和CDBB造就物均呈阳性：其中16例两种造就基均为阳性，20例仅CDBB-TC为阳性，其中5例仅从CDBB中呈阳性
。对于一种造就基呈阴性而另一种造就基呈阳性的环境样本，用艰巨梭菌乳胶凝聚试验对阴性样品进行验证试验，谷氨酸脱氢酶和毒素A和B的EIA，毒素B基因的PCR均为阴性
。若是以所有艰巨梭菌阳性造就作为尺度，CDBB-TC的敏感性显著高于CDBB（36/41[88%]vs21/41[51%]
；P=0.006），对于接受其他验证性试验的18份CDBB-TC造就阳性标本，CDBB-TC管底部的18个（100%）等分经其他确认试验检测为阳性，蕴含艰巨梭菌乳胶凝聚，毒素B基因的PCR，以及谷氨酸脱氢酶和毒素A、B的EIA
。对于8个造就阴性的CDBB试管和8个造就阴性的CDBB-TC试管，通过一样的验证试验，试管底部的肉汤均为阴性
。

在477个环境造就中，基于没有艰巨梭菌的假阳性黄色造就基的CDBB-TC和CDBB的特异性别离为100%（0个假阳性了局）和96%（18个假阳性了局）（P=0.0001）
。18个CDBB假阳性造就可归因于非艰巨梭菌厌氧生物的成长，而它们没有在CDBB-TC的有氧环境中成长
。

钻研了分歧pH值下硫代乙醇酸对艰巨梭菌孢子萌发的影响：

    如图4所示，艰巨梭菌孢子在无菌水中或1 mg/ml硫乙醇酸且pH 5时最幼萌发（基于1 mg/ml溶菌酶的孢子削减）（P≥0.82）
；但是，在pH7.6，在80°C时，1 mg/ml硫乙醇酸（P＜0.0001）中孢子显著削减，溶菌酶没有进一步加强（P=0.74）
。

会商：综合钻研报路及尝试了局批注：pH值为7.6而非pH值为5时，硫代乙醇酸能够刺激环境孢子复原，溶菌酶提高艰巨梭菌从环境样品中的回收率
。硫代乙醇酸可能使孢子对溶菌酶活性敏感，可能是通过粉碎二硫键和增长溶菌酶对作用位点的渗入
。

含有硫代乙醇酸和L-胱氨酸的肉汤造就基为环境标本提供了一种敏感和更具选择性的造就步骤，而不必要厌氧造就前提
。这种造就基很容易造备，且价值相对便宜
。此表，对微生物学专业知识的要求，由于基于色彩变动的阳性肉汤样品能够被确以为艰巨梭菌
。

无数厌氧生物在CDBB上成长，并导致色彩变为黄色
。这些生物在有氧前提下造就的CDBB-TC中不成长，但在厌氧前提下造就的CDBB-TC上成长，这批注CDBB-TC比CDBB更拥有选择性
。

本钻研还拥有肯定的局限性
。造就基是定性的，不能对传染负荷进行评估
。与海绵相比，拭子回收孢子的活络度可能会降低，并且环境样本仅从一家机构采集，还需在多个机构额表进行更大规模的钻研
。最后只测试了一种商用实时 PCR 检测步骤，分歧核扩增检测步骤的活络度可能存在差距
。